基因擴(kuò)增（PCR）實(shí)驗(yàn)室設(shè)計(jì)方案

臨床基因擴(kuò)增實(shí)驗(yàn)又稱PCR實(shí)驗(yàn)，是專門用來檢驗(yàn)艾滋病、乙型肝炎、禽疫病等病毒感染性疾病的一種檢測手段。它可以通過將病毒體內(nèi)所含的基因進(jìn)行擴(kuò)增的方法，測出一些病毒含量不高的感染者體內(nèi)是否含有特定的病毒。由于該檢測方法可以測出普通檢驗(yàn)難以檢測出的病毒并具有靈敏度高、特異性高、快捷、對樣品要求低等優(yōu)點(diǎn)，因此被臨床醫(yī)生廣為認(rèn)可，已廣泛應(yīng)用于醫(yī)院的臨床診斷和各防疫檢測部門的禽疫病診斷。

【基因擴(kuò)增實(shí)驗(yàn)室（PCR）概述】

近年來對臨床基因擴(kuò)增檢驗(yàn)實(shí)驗(yàn)室的建設(shè)越來越得到重視，因?yàn)樗鼘z測結(jié)果的可靠性、準(zhǔn)確性和安全性起到至關(guān)重要的作用。本文主要從臨床基因擴(kuò)增檢驗(yàn)實(shí)驗(yàn)室的平面布局，空調(diào)通風(fēng)系統(tǒng)設(shè)計(jì)、氣流控制和污染的防制幾個(gè)方面對實(shí)驗(yàn)室設(shè)計(jì)中的主要特點(diǎn)進(jìn)行了闡述。臨床基因擴(kuò)增檢驗(yàn)實(shí)驗(yàn)室設(shè)計(jì)的核心問題是如何避免污染。因此，實(shí)驗(yàn)室設(shè)計(jì)依據(jù)、實(shí)驗(yàn)室的平面布局、實(shí)驗(yàn)室裝飾材料的選擇、空調(diào)通風(fēng)系統(tǒng)設(shè)計(jì)、氣流控制等都是圍繞這個(gè)核心問題進(jìn)行的。下面就對這幾個(gè)方面分別進(jìn)說明。

【基因擴(kuò)增實(shí)驗(yàn)室（PCR）設(shè)計(jì)依據(jù)】

《醫(yī)療機(jī)構(gòu)臨床基因擴(kuò)增管理辦法》

《生物安全實(shí)驗(yàn)室建筑技術(shù)規(guī)范》

GB50346-2004 《潔凈廠房設(shè)計(jì)規(guī)范》

GB50073-2001 《高效空氣過濾器》

GB13554-92 《實(shí)驗(yàn)室生物安全通用要求》

GB1989-2004 《微生物和生物醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)室生物安全通用準(zhǔn)則》WS233-2002

【實(shí)驗(yàn)室布局設(shè)計(jì)】

臨床基因擴(kuò)增檢驗(yàn)實(shí)驗(yàn)室原則上分為四個(gè)單獨(dú)的工作區(qū)域：試劑貯存和準(zhǔn)備區(qū)、標(biāo)本制備區(qū)、擴(kuò)增反應(yīng)混合物配制和擴(kuò)增區(qū)、擴(kuò)增產(chǎn)物分析區(qū)。為避免交叉污染，進(jìn)入各個(gè)工作區(qū)域必須嚴(yán)格遵循單一方向進(jìn)行，即只能從試劑貯存和準(zhǔn)備區(qū)→標(biāo)本制備區(qū)→擴(kuò)增反應(yīng)混合物配制和擴(kuò)增區(qū)→擴(kuò)增產(chǎn)物分析區(qū)。各實(shí)驗(yàn)區(qū)之間的試劑及樣品傳遞應(yīng)通過傳遞窗進(jìn)行。

【實(shí)驗(yàn)室裝飾材料】

實(shí)驗(yàn)室設(shè)計(jì)為全封閉空間，空間四周及上層均為50mm厚手工彩鋼板結(jié)構(gòu)，填充物為阻燃材料，主體顏色為啞白色，門窗玻璃為50mm厚雙層中空鋼化玻璃嵌入手工彩鋼板卡槽內(nèi)，如采用機(jī)制彩鋼板為防止沉積灰塵，窗料使用R25MM鋁合金圓弧壓線。

所有二維連接處的內(nèi)側(cè)均使用R50MM鋁合金內(nèi)圓角，暴露在外的二維連接線的外側(cè)則用R100MM鋁合金外角連接;彩鋼板的三維連接處使用三維接點(diǎn)過度，而彩鋼板與墻角地面則用鋁合金槽連接。

吊頂材料亦為彩鋼板，地面為環(huán)氧樹脂材料，具有無縫隙、耐腐蝕、平整、容易清洗的特征。地面地腳線用陰角鋁材裝飾，美觀且嚴(yán)密性好。整個(gè)實(shí)驗(yàn)室內(nèi)應(yīng)形成堅(jiān)固、無縫、平滑、美觀、不反光、不積塵、不生銹、防潮、抗菌、性能優(yōu)良的無菌表面和內(nèi)殼。基因檢測實(shí)驗(yàn)室入口設(shè)置有門禁和實(shí)時(shí)攝像頭，可有效控制非授權(quán)人員的進(jìn)入。

【通風(fēng)壓力控制】

基因擴(kuò)增（PCR）實(shí)驗(yàn)室并沒有嚴(yán)格的凈化要求，但是為避免各個(gè)實(shí)驗(yàn)區(qū)域間交叉污染的可能性，宜采用全送全排的氣流組織形式。同時(shí)，要嚴(yán)格控制送、排風(fēng)的比例以保證各實(shí)驗(yàn)區(qū)的壓力要求。

（一）試劑貯存和準(zhǔn)備區(qū)該實(shí)驗(yàn)區(qū)主要進(jìn)行的操作為貯存試劑的制備、試劑的分裝和主反應(yīng)混合液的制備。試劑和用于標(biāo)本制作的材料應(yīng)直接運(yùn)送至該區(qū)，不得經(jīng)過其他區(qū)域。試劑原材料必須貯存在本區(qū)內(nèi)，并在本區(qū)內(nèi)制備成所需的貯存試劑。對與氣流壓力的控制，本區(qū)并沒有嚴(yán)格的要求。

（二）標(biāo)本制備區(qū)該區(qū)域主要進(jìn)行的操作為臨床標(biāo)本的保存、核酸(RNA、DNA）提取、貯存及其加入至擴(kuò)增反應(yīng)管和測定RNA時(shí)cDNA的合成。本區(qū)的壓力梯度要求為：相對于鄰近區(qū)域?yàn)檎龎?，以避免從鄰近區(qū)進(jìn)入本區(qū)的氣溶膠污染。另外，由于在加樣操作中可能會(huì)發(fā)生氣溶膠所致的污染，所以應(yīng)避免在本區(qū)內(nèi)不必要的走動(dòng)。